隨著(zhù)單細胞組學(xué)研究的飛速發(fā)展，組織提核技術(shù)逐漸成為單細胞研究中的必要手段。單核測序相較單細胞測序有著(zhù)諸多優(yōu)勢：簡(jiǎn)單快捷的實(shí)驗步驟，更少細胞解離引起的類(lèi)型偏好，解除細胞大小對微流控捕獲效率的偏好，減少解離時(shí)應激基因誘導的轉錄假象，使細胞直徑過(guò)大、細胞形狀不規則、凍存組織做單細胞研究成為可能。目前神經(jīng)細胞[1-3]、心臟[4]、腎臟[5-6]、肝臟[7-8]、脂肪[9-10]等的單細胞研究均可選用細胞核進(jìn)行實(shí)驗。
然而提核技術(shù)也存在一定問(wèn)題，比如提核后的細胞核狀態(tài)不好、細胞核的得率較低、細胞核易粘連、碎片和雜質(zhì)過(guò)多且難以去除等。
為提高科研服務(wù)水平，優(yōu)化提核技術(shù)，助力單細胞研究，博奧晶典研究人員經(jīng)過(guò)不斷鉆研，攻克技術(shù)難關(guān)，成功研發(fā)出【動(dòng)物組織細胞核分離試劑盒】。目前此款試劑盒已成功測試新鮮組織、凍存組織的多種組織類(lèi)型，包括小鼠腦、人腦、小鼠心臟、小鼠腎臟、小鼠肝臟、人腦、人卵巢、人肺、豬心臟、肝臟、脂肪等等，數據結果表現優(yōu)秀。
圖1 博奧晶典自研組織細胞核分離試劑盒
檢驗原理
該試劑盒通過(guò)利用表面活性劑破壞組織細胞的膜和蛋白質(zhì)結構，釋放細胞核，使之處于游離狀態(tài)，然后通過(guò)密度梯度離心純化細胞核。得到的純凈細胞核可適用于單細胞核轉錄組、單細胞 ATAC-seq 和單細胞多組學(xué)等實(shí)驗。
主要組成成分
表1：博奧晶典自研組織細胞核分離試劑盒主要組成成分表
部分測試數據展示
圖2 人卵巢 OCT 包埋組織（左上）、豬心臟（右上）、人腦（左下）、小鼠腎臟（右下）提核結果
圖3 小鼠腦提核數據展示（細胞活率0.12%、結團率5.86%）
圖4 小鼠腦提核樣本的3’單細胞轉錄組小測結果（細胞數7746，基因中位數1582）
經(jīng)過(guò)以上數據展示，可以發(fā)現博奧晶典自主研發(fā)的核分離試劑盒在各類(lèi)新鮮組織、凍存組織提核的實(shí)驗中表現很好。尤其是從小鼠腦單細胞核轉錄組的實(shí)際小測數據和分析結果來(lái)看，在測序飽和度不高的前提下，捕獲細胞數、基因中位數、Fraction Reads in Cell 等重要指標非常良好。此外細胞分群效果良好，星形膠質(zhì)細胞、少突膠質(zhì)細胞、小神經(jīng)膠質(zhì)細胞、興奮性神經(jīng)元、抑制性神經(jīng)元等關(guān)鍵細胞類(lèi)型均得到了很好的鑒定，各細胞類(lèi)型的數量和比例符合理論值。
經(jīng)過(guò)上述介紹，相信您對這款試劑盒已經(jīng)有了一些了解，博奧晶典始終以更高標準的服務(wù)、追求卓越的態(tài)度提供科研服務(wù)，希望博奧晶典自研【動(dòng)物組織細胞核分離試劑盒】可以助您更好的開(kāi)展單細胞組學(xué)實(shí)驗，為您提供更加準確的單細胞組學(xué)方案。
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